厂家揭秘：真菌荧光染色液试剂的制备、原理及临床检验应用

山东国康真菌荧光染色液作为临床真菌快速检测的核心试剂，凭借制备标准化、原理靶向化、应用高效化的优势，实现 10 分钟内真菌精准显影，检出率较传统 KOH 湿片法提升 30% 以上，成为基层医院、三甲检验科、皮肤科的优选检测方案。

一、 真菌荧光染色液的标准化制备工艺

山东国康真菌荧光染色液采用复合配方 + 无菌制备流程，确保试剂稳定性与特异性，核心制备步骤如下：

核心原料筛选与配比

荧光探针：选用对真菌细胞壁几丁质、β- 葡聚糖具有高亲和力的荧光染料（如荧光增白剂 28、钙荧光白），这是区别于细菌、人体细胞的关键靶点，配比浓度控制在 0.01%~0.05%，保证染色效率且无背景干扰。

背景抑制剂：添加非离子表面活性剂（如吐温 - 20），降低人体上皮细胞、白细胞等杂质的非特异性荧光吸附，提升真菌与背景的对比度。

缓冲液体系：真菌荧光染色液试剂采用 pH 7.2~7.4 的磷酸盐缓冲液（PBS）作为溶剂，维持染料活性与样本渗透压，避免真菌形态变形。

无菌制备与分装

原料混合后经0.22μm 滤膜过滤除菌，全程在无菌操作台进行，防止杂菌污染。

分装至棕色避光试剂瓶，避免荧光染料遇光分解，常温保存有效期可达 12 个月，4℃冷藏可延长至 18 个月。

质量控制标准

阳性对照：加入白色念珠菌标准菌株悬液，染色后荧光显微镜下应观察到清晰的孢子与假菌丝荧光信号。

阴性对照：加入人体红细胞悬液，染色后无明显荧光，确保无交叉染色。

二、 真菌荧光染色液的核心作用原理

真菌荧光染色的本质是靶向结合 + 荧光激发的双重机制，实现真菌与背景的精准区分：

靶向结合机制

真菌细胞壁的主要成分是几丁质和 β- 葡聚糖，而人体细胞、细菌细胞壁不含此类物质。染色液中的荧光染料分子可通过氢键、疏水作用特异性锚定在几丁质的 N - 乙酰葡萄糖胺残基上，形成稳定的染料 - 细胞壁复合物，不与其他生物组织结合。

荧光激发机制

染色后的样本经荧光显微镜蓝光激发通道（激发波长 450~490nm）照射，染料分子吸收光能后跃迁到激发态，回到基态时释放出波长为 500~550nm 的蓝绿色荧光。

背景抑制剂的存在，使杂质无法产生有效荧光，最终在暗背景下呈现出明亮的真菌荧光信号，实现 “靶向显影”。

三、 真菌荧光染色液在临床检验中的核心应用

真菌荧光染色液试剂适用于各类临床样本的真菌快速筛查，覆盖多个科室，解决传统培养法周期长、漏检率高的痛点：

适用样本类型与科室场景

样本类型 对应科室 检测目标真菌 临床意义

皮屑、甲屑、毛发 皮肤科 皮肤癣菌（红色毛癣菌等）、念珠菌 快速诊断手足癣、甲癣、头癣

痰液、肺泡灌洗液 呼吸内科 曲霉、念珠菌、隐球菌 预警肺部真菌感染，尤其是 ICU 重症患者

阴道分泌物 妇科 白色念珠菌 诊断霉菌性阴道炎

脑脊液、血液 神经内科、血液科 隐球菌、念珠菌 排查真菌性脑膜炎、败血症

临床应用优势（对比传统检测方法）

真菌荧光染色液试剂检测速度快：样本处理 + 染色 + 镜检全程仅需 10~15 分钟，而传统真菌培养需 3~7 天，可快速为重症患者提供诊疗依据。

检出率高：对微量真菌（如单个孢子、断裂菌丝）的检出率≥95%，远高于 KOH 湿片法（60%~70%），减少漏诊。

操作门槛低：无需复杂预处理，基层检验人员经简单培训即可上手，荧光信号清晰易判读，降低经验依赖。

适用范围广：可检测念珠菌、曲霉、隐球菌、皮肤癣菌等绝大多数致病真菌，满足多科室需求。

标准化操作流程（临床常规步骤）

样本预处理：液体样本（痰液、脑脊液）直接涂片干燥；固体样本（皮屑、甲屑）加生理盐水研磨成混悬液后涂片干燥。

染色孵育：滴加 2~3 滴染色液覆盖样本，室温孵育 2 分钟（无需避光）。

洗涤干燥：用生理盐水轻冲载玻片，吸去多余染液，自然干燥。

镜检判读：蓝光激发通道下，低倍镜（10×）扫描全片，高倍镜（40×）确认；明亮蓝绿色荧光的圆形孢子 / 细长菌丝为阳性，无特异性荧光为阴性。

四、 山东国康真菌荧光染色液的产品优势

高特异性：仅结合真菌细胞壁，不染色人体细胞与细菌，背景干净，判读直观。

稳定性强：避光保存下性能稳定，反复冻融后仍可保持染色效果，适合临床批量检测。

性价比高：单样本检测成本低于传统培养法，且无需昂贵耗材，基层医院可大规模推广。

配套服务完善：提供标准化操作 SOP、荧光显微镜调试指导，以及临床检测案例解读支持。

山东国康温馨提示

真菌荧光染色液为定性筛查工具，若需明确菌种鉴定与药敏试验，需结合真菌培养法进一步检测；对于重症感染患者，可先通过染色液快速筛查，及时启动经验性治疗，降低病死率。